بیکٹیریل اینڈوٹوکسین ٹیسٹ میں کروموجینک تکنیک کا اطلاق

کروموجینک تکنیک ان تین تکنیکوں میں سے ہے جس میں جیل کلٹ تکنیک اور ٹربیڈیمیٹرک تکنیک بھی ہوتی ہے جس میں ہارس شو کریب (لیمولس پولی فیمس یا ٹیچیپلس ٹرائیڈینٹس) کے نیلے خون سے نکالے گئے امیبوسائٹ لائسیٹ کا استعمال کرتے ہوئے گرام منفی بیکٹیریا سے اینڈوٹوکسین کا پتہ لگانے یا ان کی مقدار درست کرنے کے لیے ہوتا ہے۔اس کو مخصوص پرکھ کے اصول کی بنیاد پر اختتامی نقطہ-کروموجینک پرکھ یا ایک متحرک-کروموجینک پرکھ کے طور پر درجہ بندی کیا جاسکتا ہے۔

رد عمل کا اصول یہ ہے کہ: امیبوسائٹ لیسیٹ میں سیرین پروٹیز انزائمز (پروینزائمز) کا ایک جھڑپ ہوتا ہے جسے بیکٹیریل اینڈوٹوکسین کے ذریعے چالو کیا جا سکتا ہے۔Endotoxins ایکٹیویٹڈ انزائمز (coagulase) پیدا کرنے کے لیے پروینزائمز کو چالو کرتے ہیں، مؤخر الذکر بے رنگ سبسٹریٹ کی تقسیم کو اتپریرک کرتا ہے، جس سے پیلے رنگ کی مصنوعات کا pNA جاری ہوتا ہے۔جاری کردہ پی این اے کو فوٹو میٹرک طور پر 405nm پر ماپا جا سکتا ہے۔اور جذب کو مثبت طور پر اینڈوٹوکسین کے ارتکاز کے ساتھ منسلک کیا جاتا ہے، پھر اینڈوٹوکسین کی حراستی کو اسی کے مطابق مقدار میں طے کیا جا سکتا ہے۔