اینڈوٹوکسین ٹیسٹ آپریشن میں تجرباتی مداخلت سے کیسے بچیں؟

بیکٹیریل اینڈوٹوکسن ٹیسٹ (BET) زیادہ تر جدید لیبارٹریوں میں کنٹرول شدہ حالات میں مداخلت سے بچنے کے لیے اہم عنصر کے طور پر کیا جاتا ہے۔

مناسبسیپٹک تکنیکمعیارات کو تیار کرنے اور کمزور کرنے اور نمونوں کو سنبھالنے کے وقت اہم ہے۔گاؤننگعام لیبارٹری کے ذاتی حفاظتی سامان سے باہر مشق کریں (پی پی ای) تقاضے اس وقت تک تشویش کی بات نہیں ہیں جب تک کہ ٹیسٹ کے تحت پروڈکٹ زہریلے یا متعدی پن کی وجہ سے مخصوص تجزیہ کار حفاظتی تحفظات کا مطالبہ نہ کرے۔دستانےTALC سے پاک ہونا چاہیے، کیونکہ TALC میں endotoxins کی اہم سطحیں ہوسکتی ہیں۔پلیٹ ریڈرز، پانی کے حمام، اور خشک گرمی کے بلاکسنمونہ انکیوبیشن کے لیے استعمال ہونے والا لیبارٹری بینچ پر ہیٹنگ، وینٹیلیشن، اور ایئر کنڈیشنگ (HVAC) ڈکٹوں، اہم وائبریشن، اور لیبارٹری ٹریفک سے دور ہونا چاہیے جو ٹیسٹ کے نتائج کو متاثر کر سکتا ہے۔نمونے کے انعقاد کے اوقات اور حالاتاس بات کو یقینی بنانے کے لیے کہ مناسب وقت میں درست ٹیسٹ کے نتائج پیدا کیے جا سکیں، اگر ضروری ہو تو اس کا تعین اور بعد میں دستاویزی دستاویز کی جائے۔

مثال کے طور پر، اگر لیبارٹری کو پانی کے لیے انجکشن (WFI) یا ان پراسیس کا نمونہ ملتا ہے، تو کیا اسے فریج میں رکھنا چاہیے یا اسے کمرے کے درجہ حرارت پر رکھا جا سکتا ہے، اور کتنی دیر تک؟جانچ سے پہلے، یہ سفارش کی جاتی ہے کہ براہ راست ٹیسٹنگ یا بعد میں کم کرنے کے لیے ٹیسٹ ایلی کوٹ (زبانیں) کو ہٹانے سے پہلے بنیادی نمونے کے برتنوں کو مناسب طریقے سے ملایا جائے۔

بائیو اینڈو بیکٹیریل اینڈوٹوکسن ٹیسٹ، تجربات بھی شامل ہیں۔جیل جمنے کا طریقہاینڈوٹوکسین ٹیسٹ پرکھ اورمقداری اینڈوٹوکسین ٹیسٹ پرکھ, جیل جمنے کا طریقہ اینڈوٹوکسین ٹیسٹ پرکھ کوالٹیٹیو اینڈوٹوکسین کا پتہ لگانا ہے، ان تجربے کے لیے استعمال کی جانے والی اشیاء کو ڈیپائروجینیشن پروسیسنگ کی ضرورت ہوتی ہے، جیسے اینڈوٹوکسین فری ری ایکشن ٹیوبیں، ڈیلیشن ٹیوبیں اور پائروجن فری ٹپس؛مقداری اینڈوٹوکسین کا پتہ لگانے میں کائنےٹک کروموجینک اینڈوٹوکسن ٹیسٹ، کائنےٹک ٹربائیڈیمیٹرک اینڈوٹوکسن ٹیسٹ ہوتا ہے، ان تجربے کے لیے استعمال کی جانے والی اشیاء کو اینڈوٹوکسین کی اعلی سطح کو پورا کرنے کی ضرورت ہوتی ہے۔0.005EU/ml( 0.001EU/ml )، جیسے اینڈوٹوکسین فری ٹیوبز، پائروجن فری ٹپس، اور پائروجن فری مائیکرو پلیٹس، یہاں تک کہ پائروجن فری ریزروائر۔ویسے، اگر نمونوں کا علاج کیا جائے تو کنٹینر کو اینڈوٹوکسین فری نمونہ کی بوتل ہونی چاہیے۔

 

اینڈوٹوکسین ٹیسٹنگ میں، مداخلت مختلف ذرائع سے پیدا ہو سکتی ہے، جیسے نمونہ میٹرکس کے اجزاء، ٹیسٹ ری ایجنٹس، یا سامان۔

تجرباتی مداخلت سے بچنے کے لیے درج ذیل اقدامات کیے جا سکتے ہیں۔

1. نمونہ کی تیاری: درست اینڈوٹوکسین ٹیسٹنگ کے لیے نمونے کی مناسب تیاری ضروری ہے۔

اینڈوٹوکسین پرکھ کے ساتھ مطابقت کو یقینی بنانے کے لیے نمونہ میٹرکس کی اچھی طرح جانچ کی جانی چاہیے اور اسے بہتر بنایا جانا چاہیے۔

خاص طور پر، مداخلت کرنے والے مادوں جیسے لپڈ اور پروٹین کو مناسب تکنیکوں جیسے فلٹریشن یا سینٹرفیوگریشن کا استعمال کرتے ہوئے ہٹایا جانا چاہیے یا کم کرنا چاہیے۔

2. مثبت اور منفی کنٹرول: مداخلت کی نگرانی کے لیے پرکھ میں مثبت اور منفی کنٹرول شامل کرنا ضروری ہے۔

مثبت کنٹرول ٹیسٹ کی فعالیت کی تصدیق کرتے ہیں، جبکہ منفی کنٹرول پرکھ کے اجزاء سے کسی آلودگی یا مداخلت کا پتہ لگاتے ہیں۔

3. کوالٹی کنٹرول: کوالٹی کنٹرول پرکھ میں استعمال ہونے والے تمام ری ایجنٹس، آلات اور پانی پر کیا جانا چاہیے۔

یہ یقینی بناتا ہے کہ ریجنٹس اینڈوٹوکسین آلودگی سے پاک ہیں اور صحیح طریقے سے کام کر رہے ہیں۔

4. معیاری کاری: پرکھ کو معیاری بنایا جانا چاہیے تاکہ یہ یقینی بنایا جا سکے کہ تمام نتائج موازنہ اور دوبارہ پیدا کیے جا سکتے ہیں۔

اس میں پرکھ کیلیبریٹ کرنے کے لیے معیاری وکر کا استعمال اور نمونے کی تیاری، انکیوبیشن اور پتہ لگانے کے لیے معیاری تکنیکوں کا استعمال شامل ہے۔

5. توثیق: پرکھ کی توثیق کی جانی چاہیے تاکہ یہ یقینی بنایا جا سکے کہ یہ مخصوص، حساس اور قابل اعتماد ہے۔

اس میں پرکھ کی درستگی اور درستگی کا تعین کرنے کے لیے نمونوں کی ایک رینج کی جانچ شامل ہے، جن میں اینڈوٹوکسین کے لیے جانا جاتا ہے۔

ان اقدامات پر عمل کرکے، مداخلت کو کم کیا جا سکتا ہے، اور درست اینڈوٹوکسین ٹیسٹنگ حاصل کی جا سکتی ہے۔